[صفحه اصلی ]   [Archive] [ English ]  
:: صفحه اصلي :: معرفي مجله :: آخرين شماره :: آرشيو مقالات :: جستجو :: ثبت نام :: ارسال مقاله :: تماس با ما ::
:: دوره 21، شماره 3 - ( پاییز 1398 ) ::
جلد 21 شماره 3 صفحات 120-128 برگشت به فهرست نسخه ها
شناسایی باکتری‌های موجود در صفرای بیماران مبتلا به مشکلات صفراوی و بررسی تولید بیوفیلم در جدایه‌های شایع
پرستو احسانی* 1، فاطمه فراهانی2 ، نگار دایی زاده3 ، ملیکا امیا2 ، معین صالح4 ، مینا ابراهیمی راد5 ، کرم الله طولابی6
1- دکتری فراورده های بیولوژیک، دانشیار، بخش بیولوژی مولکولی باکتری‌ها، انستیتو پاستور ایران، تهران، ایران ، p_ehsani@yahoo.com
2- کارشناسی ارشد میکروبشناسی، بخش بیولوژی مولکولی باکتری‌ها، انستیتو پاستور ایران، تهران، ایران
3- کارشناسی ارشد بیوتکنولوژی، بخش بیولوژی مولکولی باکتری‌ها، انستیتو پاستور ایران، تهران، ایران
4- کارشناسی ارشد بیوتکنولوژی میکروبی، بخش بیولوژی مولکولی باکتری‌ها، انستیتو پاستور ایران، تهران، ایران
5- دکتری بیوتکنولوژی پزشکی، استادیار، بخش بیوشیمی انستیتو پاستور ایران، تهران، ایران
6- جراح، دانشیار، بخش جراحی لاپاراسکوپی، بیمارستان امام خمینی، تهران، ایران
چکیده:   (662 مشاهده)

زمینه و هدف: عفونت‌های مختلف در سیستم مجاری صفراوی و تشکیل سنگ از عوامل انسداد جریان صفرا در آن ارگان استریل است. این مطالعه به منظور شناسایی باکتری‌های موجود در صفرای بیماران مبتلا به مشکلات صفراوی و بررسی تولید بیوفیلم در جدایه‌های شایع انجام شد.

روش بررسی: این مطالعه توصیفی آزمایشگاهی روی 35 نمونه (سنگ و بافت صفرا) جمع‌آوری شده در شرایط استریل (به روش لاپاراسکوپی) از بخش جراحی بیمارستان امام‌ خمینی تهران طی شش‌ماه اول سال 1395 انجام شد. نوع سنگ‌ها به‌کمک روش‌های شیمیایی و نوع میکروب‌ها با استفاده از آزمایشات بیوشیمیایی و مولکولی تعیین شدند. برای جستجوی باکتری‌ها در نمونه‌های منفی، DNA از بافت کیسه صفرا تخلیص شد و با استفاده از پرایمرهای 1492R وF 27 برای تکثیر قطعه‌ای از ژن 16SrRNA الگو قرار گرفت. نوع باکتری در نمونه‌های مثبت به‌کمک بانک اطلاعاتی NCBI تعیین شد. شایع‌ترین جدایه از لحاظ شدت تولید بیوفیلم به‌کمک روش میکرو تیترپلیت و ژن‌های درگیر این فنوتیپ Ag43(Flu) و CsgF به‌روش PCR مورد بررسی قرار گرفت. مقاومت آنتی‌بیوتیکی آنها با استفاده از روش دیسک دیفیوژن تعیین گردید.

یافته‌ها: تعداد 13 نمونه دارای انواع باکتری شامل 3 جدایه کلبسیلا، 4 جدایه اشریشیا کلی، یک جدایه انتروباکتر، 2 جدایه استافیلوکوکوس اورئوس، 2 جدایه انتروکوک و یک جدایه استرپتوکوکوس بودند. از ۲۳ مورد نمونه صفرا، در 65.7% موارد بااستفاده از روش کشت میکروبیولوژیک، باکتری جدا نگردید؛ ولی هفت باکتری شامل شش سویه کلبسیلا و یک انتروکوک با استفاده از تکثیر 16SrRNA و تعیین ترادف شناسایی شدند. بنابراین، در مجموع گونه کلبسیلا (47.36%) بیشترین سهم را در عفونت‌های کیسه صفرا نشان داد. ترکیبات کلسترولی و بیلی‌روبینی در 98درصد نمونه‌های حاوی سنگ دیده شد. با وجود آن که وفور کلبسیلا در عفونت‌های کیسه صفرا (47.36%) بیش از بقیه باکتری‌ها بود. بیشترین باکتری قابل کشت اشریشیا کلی بود. کلیه اشریشیا کلی‌های مورد بررسی دارای ژن‌های عامل ایجاد بیوفیلم بودند؛ ولی شدت تشکیل بیوفیلم در دو مورد از آنها قوی و در دو مورد دیگر متوسط بود. این باکتری‌ها نسبت به اکثر آنتی‌بیوتیک‌ها حساس بودند و به تتراسیکلین، سیپروفلوکسازین و سفتی زیدیم مقاومت‌های متفاوتی را نشان دادند و به تتراسیکلین مقاوم‌تر بودند.

نتیجه‌گیری: باکتری‌های غیرقابل کشت سهم مهمی در عفونت‌های کیسه صفرا دارند. توانایی بالای ایجاد بیوفیلم در باکتری‌های شایع جداشده هشداری برای مداقه در تجویز آنتی‌بیوتیک‌ها برای از بین بردن این بیوفیلم‌های عفونی در عفونت‌های کیسه صفرا را نشان می‌دهد.

واژه‌های کلیدی: سنگ صفراوی، آنتروباکتریاسه، بیوفیلم، Polymerase Chain Reaction
متن کامل [PDF 323 kb]   (84 دریافت)    
نوع مطالعه: تحقيقي | موضوع مقاله: میکروب شناسی
* نشانی نویسنده مسئول: تهران، خیابان فروردین، پلاک 69، بخش بیولوژی مولکولی انستیتو پاستور ایران، تلفن 64112219-021
فهرست منابع
1. Sifri CD, Madoff LC. Infections of the liver and biliary system. In: Mandell GL, Bennett JE, Dolin R. Mandell, Douglas, and Bennett's Principles and Practice of Infectious Diseases. 7th ed. Philadelphia: Churchill Livingstone. 2010; pp: 1035-45.
2. Melzer M, Toner R, Lacey S, Bettany E, Rait G. Biliary tract infection and bacteraemia: presentation, structural abnormalities, causative organisms and clinical outcomes. Postgrad Med J. 2007 Dec; 83(986): 773-76. doi: 10.1136/pgmj.2007.064683
3. Namias N, Demoya M, Sleeman D, Reever CM, Raskin JB, Ginzburg E, et al. Risk of postoperative infection in patients with bactibilia undergoing surgery for obstructive jaundice. Surg Infect (Larchmt). 2005; 6(3): 323-28. doi: 10.1089/sur.2005.6.323
4. Biscione FM, Couto RC, Pedrosa TM, Neto MC. Comparison of the risk of surgical site infection after laparoscopic cholecystectomy and open cholecystectomy. Infect Control Hosp Epidemiol. 2007 Sep; 28(9): 1103-6. doi: 10.1086/519931
5. Vollmer CM Jr, Callery MP. Biliary injury following laparoscopic cholecystectomy: why still a problem? Gastroenterology. 2007 Sep; 133(3): 1039-41. doi: 10.1053/j.gastro.2007.07.041
6. Vafaeimanesh J, Alebouyeh M, Seyyedmajidi M, Tajeddin E, Sherafat SJ, et al. Molecular Detection of Helicobacter Species and Other Bacteria in Human Bile Samples of Patients with Biliary Diseases. J Gastrointest Dig Syst. 2012; 2: 106. doi:10.4172/2161-069X.1000106
7. Vaishnavi C, Singh S, Kochhar R, Bhasin D, Singh G, Singh K. Prevalence of Salmonella enterica serovar typhi in bile and stool of patients with biliary diseases and those requiring biliary drainage for other purposes. Jpn J Infect Dis. 2005 Dec; 58(6): 363-65.
8. Manolis EN, Filippou DK, Papadopoulos VP, Kaklamanos I, Katostaras T, Christianakis E, et al. The culture site of the gallbladder affects recovery of bacteria in symptomatic cholelithiasis. J Gastrointestin Liver Dis. 2008 Jun; 17(2): 179-82.
9. Austin JW, Sanders G, Kay WW, Collinson SK. Thin aggregative fimbriae enhance Salmonella enteritidis biofilm formation. FEMS Microbiol Lett. 1998 May; 162(2): 295-301. doi: 10.1111/j.1574-6968.1998.tb13012.x
10. Kikuchi T, Mizunoe Y, Takade A, Naito S, Yoshida S. Curli fibers are required for development of biofilm architecture in Escherichia coli K-12 and enhance bacterial adherence to human uroepithelial cells. Microbiol Immunol. 2005; 49(9): 875-84.
11. Van Houdt R, Michiels CW. Role of bacterial cell surface structures in Escherichia coli biofilm formation. Res Microbiol. 2005 Jun-Jul; 156(5-6): 626-33. doi: 10.1016/j.resmic.2005.02.005
12. Vidal O, Longin R, Prigent-Combaret C, Dorel C, Hooreman M, Lejeune P. Isolation of an Escherichia coli K-12 mutant strain able to form biofilms on inert surfaces: involvement of a new ompR allele that increases curli expression. J Bacteriol. 1998 May; 180(9): 2442-49.
13. Hammar M, Arnqvist A, Bian Z, Olsén A, Normark S. Expression of two csg operons is required for production of fibronectin- and congo red-binding curli polymers in Escherichia coli K-12. Mol Microbiol. 1995 Nov; 18(4): 661-70.
14. Robinson LS, Ashman EM, Hultgren SJ, Chapman MR. Secretion of curli fibre subunits is mediated by the outer membrane-localized CsgG protein. Mol Microbiol. 2006 Feb; 59(3): 870-81. doi: 10.1111/j.1365-2958.2005.04997.x
15. Barnhart MM, Chapman MR. Curli biogenesis and function. Annu Rev Microbiol. 2006; 60: 131-47. doi: 10.1146/annurev.micro.60.080805.142106
16. Chapman MR, Robinson LS, Pinkner JS, Roth R, Heuser J, Hammar M, et al. Role of Escherichia coli curli operons in directing amyloid fiber formation. Science. 2002 Feb; 295(5556): 851-55. doi: 10.1126/science.1067484
17. Hammar M, Bian Z, Normark S. Nucleator-dependent intercellular assembly of adhesive curli organelles in Escherichia coli. Proc Natl Acad Sci U S A. 1996 Jun; 93(13): 6562-66. doi: 10.1073/pnas.93.13.6562
18. Loferer H, Hammar M, Normark S. Availability of the fibre subunit CsgA and the nucleator protein CsgB during assembly of fibronectin-binding curli is limited by the intracellular concentration of the novel lipoprotein CsgG. Mol Microbiol. 1997 Oct; 26(1): 11-23.
19. Sharma G, Sharma S, Sharma P, Chandola D, Dang S, Gupta S, et al. Escherichia coli biofilm: development and therapeutic strategies. J Appl Microbiol. 2016 Aug; 121(2): 309-19. doi: 10.1111/jam.13078
20. Reisner A, Haagensen JA, Schembri MA, Zechner EL, Molin S. Development and maturation of Escherichia coli K-12 biofilms. Mol Microbiol. 2003 May; 48(4): 933-46.
21. van der Woude MW, Henderson IR. Regulation and function of Ag43 (flu). Annu Rev Microbiol. 2008; 62: 153-69. doi: 10.1146/annurev.micro.62.081307.162938
22. Massarrat S. Prevalence of gallstone disease in Iran. J Gastroenterol Hepatol. 2001 May; 16(5): 564-67.
23. Weisburg WG, Barns SM, Pelletier DA, Lane DJ. 16S ribosomal DNA amplification for phylogenetic study. J Bacteriol. 1991 Jan; 173(2): 697-703. doi: 10.1128/jb.173.2.697-703.1991
24. O'Toole GA. Microtiter dish biofilm formation assay. J Vis Exp. 2011 Jan; (47) pii: 2437. doi: 10.3791/2437
25. Reshetnikov OV, Ryabikov AN, Shakhmatov SG, Malyutina SK. Gallstone disease prevalence in Western Siberia: cross-sectional ultrasound study versus autopsy. J Gastroenterol Hepatol. 2002 Jun; 17(6): 702-707.
26. Ersumo T. Gallstone disease in a teaching hospital, Addis Ababa: a 5-year review. Ethiop Med J. 2006 Jan; 44(1): 49-59.
27. Stewart L, Griffiss JM, Jarvis GA, Way LW. Gallstones containing bacteria are biofilms: bacterial slime production and ability to form pigment solids determines infection severity and bacteremia. J Gastrointest Surg. 2007 Aug; 11(8): 977-83. doi: 10.1007/s11605-007-0168-1
28. Swidsinski A, Schlien P, Pernthaler A, Gottschalk U, Bärlehner E, Decker G, et al. Bacterial biofilm within diseased pancreatic and biliary tracts. Gut. 2005 Mar; 54(3): 388-95. doi: 10.1136/gut.2004.043059
29. Shen H, Ye F, Xie L, Yang J, Li Zh, Xu P, et al. Metagenomic sequencing of bile from gallstone patients to identify different microbial community patterns and novel biliary bacteria. Sci Rep. 2015; 5: 17450. doi: 10.1038/srep17450
30. Tajeddin E, Jahani Sherafat S, Seyyed Majidi MR, Alebouyeh M, Nazemalhosseini Mojarad E, Pourhossengholi A, et al. [The Frequency of Bacterial Agents in the Bile Juice of Patients with Bile Stones and Biliary Disorders]. Med Lab J. 2011; 5(2): 34-43. [Article in Persian]
31. Tajbakhsh E, Ahmadi P, Abedpour-Dehkordi E, Arbab-Soleimani N, Khamesipour F. Biofilm formation, antimicrobial susceptibility, serogroups and virulence genes of uropathogenic E. coli isolated from clinical samples in Iran. Antimicrobial Resistance & Infection Control. 2016; 5: 11. https://doi.org/10.1186/s13756-016-0109-4
32. Taghadosi R, Shakibaie MR, Ghanbarpour R, Hosseini-Nave H. Role of antigen-43 on biofilm formation and horizontal antibiotic resistance gene transfer in non-O157 Shiga toxin producing Escherichia coli strains. Iran J Microbil. 2017; 9(2): 98-96.
ارسال پیام به نویسنده مسئول


XML   English Abstract   Print


Download citation:
BibTeX | RIS | EndNote | Medlars | ProCite | Reference Manager | RefWorks
Send citation to:

Ehsani P, Farahany F, Daeizadeh N, Amya M, Saleh M, Ebrahimi-Rad M et al . Determination of bacteria in gallbladder of patients with cholelithiasis and evaluation of pathogenic factors of the prevalent isolated bacteria. J Gorgan Univ Med Sci. 2019; 21 (3) :120-128
URL: http://goums.ac.ir/journal/article-1-3422-fa.html

احسانی پرستو، فراهانی فاطمه، دایی زاده نگار، امیا ملیکا، صالح معین، ابراهیمی راد مینا و همکاران.. شناسایی باکتری‌های موجود در صفرای بیماران مبتلا به مشکلات صفراوی و بررسی تولید بیوفیلم در جدایه‌های شایع. مجله علمي دانشگاه علوم پزشكي گرگان. 1398; 21 (3) :120-128

URL: http://goums.ac.ir/journal/article-1-3422-fa.html



دوره 21، شماره 3 - ( پاییز 1398 ) برگشت به فهرست نسخه ها
مجله علمی دانشگاه علوم پزشکی گرگان Journal of Gorgan University of Medical Sciences
Persian site map - English site map - Created in 0.06 seconds with 31 queries by YEKTAWEB 3991