[صفحه اصلی ]   [Archive] [ English ]  
:: صفحه اصلي :: معرفي مجله :: آخرين شماره :: آرشيو مقالات :: جستجو :: ثبت نام :: ارسال مقاله :: تماس با ما ::
:: دوره 21، شماره 2 - ( تابستان 1398 ) ::
جلد 21 شماره 2 صفحات 120-127 برگشت به فهرست نسخه ها
اثر هرسپتین نوترکیب بر رشد سلول‌های سرطانی پستان
نفیسه کیارستمی1 ، جعفر امانی* 2، عباسعلی ایمانی فولادی3 ، سیدعلی میرحسینی4
1- کارشناس ارشد زیست شناسی - ژنتیک، گروه زیست شناسی، واحد دامغان، دانشگاه آزاد اسلامی، دامغان، ایران
2- دانشیار، مرکز تحقیقات میکروبیولوژی کاربردی، انستیتو سیستم بیولوژی و مسمومیت ها، دانشگاه علوم پزشکی بقیه الله (عج)، تهران، ایران ، jafar.amani@gmail.com
3- استاد، مرکز تحقیقات میکروبیولوژی کاربردی، انستیتو سیستم بیولوژی و مسمومیت ها، دانشگاه علوم پزشکی بقیه الله (عج)، تهران، ایران
4- استادیار، مرکز تحقیقات میکروبیولوژی کاربردی، انستیتو سیستم بیولوژی و مسمومیت ها، دانشگاه علوم پزشکی بقیه الله (عج)، تهران، ایران
چکیده:   (524 مشاهده)

زمینه و هدف: سرطان پستان یکی از شایع‌ترین انواع سرطان در میان زنان است . مولکول HER-2 به‌عنوان گیرنده تیروزین کینازی از خانواده گیرنده‌های رشد عامل اپیدرمی، عامل اصلی سرطان است. مولکول پروتئینی هرسپتین که یک آنتی‌بادی ضد HER-2 است؛ می‌تواند نقش مهمی در تشخیص و درمان سرطان پستان داشته باشد. این مطالعه به منظور ساب کلون کردن ژن هرسپتین و سپس بیان در سیستم پروکاریوتی (E.coli) و تولید هرسپتین نوترکیب به منظور استفاده در درمان سرطان پستان انجام شد.

روش بررسی: در این مطالعه توصیفی آزمایشگاهی ژن هرسپتین از سازه سنتزی با روش هضم آنزیمی جدا و درون وکتور بیانی pET28a انتقال داده شد. زیر همسانه‌سازی ژن موردنظر با استفاده از PCR و هضم آنزمی تایید گردید. پس از انتقال وکتور نوترکیب به میزبان E.coli BL21 DE3 ، با استفاده از القاگر IPTG ژن نوترکیب هرسپتین بیان شد. پروتئین نوترکیب با استفاده از SDS-PAGE ارزیابی و تخلیص با ستون کروماتوگرافی میل ترکیبی نیکل انجام شد و در نهایت توسط وسترن بلاتینگ با استفاده از آنتی‌بادی ضدهیستیدین تایید شد. میزان کشندگی و زنده ماندن سلول‌ها در مجاورت با هرسپتین نوترکیب با روش MTT بررسی شد.

یافته‌ها: پس از ساب کلونینگ ژن هرسپتین، PCR و هضم آنزیمی، قطعه 741 جفت بازی ژن هرسپتین را تایید کرد. بیان پروتئین نوترکیب هرسپتین و ارزیابی آن بر روی ژل SDS-PAGE اندازه حدود 27 کیلودالتون را تایید کرد. پروتئین نوکیب با استفاده از آنتی‌هیستیدین نیز تایید شد. پروتئین خالص شده در مجاورت با لاین سلول SKBR3 توانایی متوقف کننده رشد سلول‌های سرطانی را داشت.

نتیجه‌گیری: با توجه به این که آنتی‌ژن HER2 به وفور بر سطح سلول‌های سرطانی پستان بیان می‌شود؛ پروتئین هرسپتین می‌تواند به‌عنوان یک آنتی‌بادی بازدارنده عمل نموده و رشد سلول‌های سرطانی پستان را مهار کند.

واژه‌های کلیدی: سرطان پستان، هرسپتین نوترکیب، آنتی ژن her-2، سلول سرطانی
متن کامل [PDF 366 kb]   (85 دریافت)    
نوع مطالعه: تحقيقي | موضوع مقاله: بیوتکنولوژی پزشکی
* نشانی نویسنده مسئول: تهران، میدان ونک، خیابان ملاصدرا، بعد از خیابان شیخ بهایی، دانشگاه علوم پزشکی بقیه الله (عج)، انستیتو سیستم بیولوژی و مسمومیت ها، مرکز تحقیقات میکروبیولوژی کاربردی، تلفن و نمابر 82482549-021
فهرست منابع
1. Thongsuksai P, Chongsuvivatwong V, Sriplung H. Delay in breast cancer care: a study in Thai women. Med Care. 2000 Jan; 38(1): 108-14.
2. Coleman MP, Quaresma M, Berrino F, Lutz JM, De Angelis R, Capocaccia R, et al. Cancer survival in five continents: a worldwide population-based study (CONCORD). Lancet Oncol. 2008 Aug; 9(8): 730-56. doi: 10.1016/S1470-2045(08)70179-7
3. Cheung KL, Graves CR, Robertson JF. Tumour marker measurements in the diagnosis and monitoring of breast cancer. Cancer Treat Rev. 2000 Apr; 26(2): 91-102. doi: 10.1053/ctrv.1999.0151
4. Hayes DF. Tumor markers for breast cancer. Current utilities and future prospects. Hematol Oncol Clin North Am. 1994 Jun; 8(3): 485-506.
5. Duffy MJ, Shering S, Sherry F, McDermott E, O'Higgins N. CA 15-3: a prognostic marker in breast cancer. Int J Biol Markers. 2000 Oct-Dec; 15(4): 330-33.
6. Ebeling FG, Stieber P, Untch M, Nagel D, Konecny GE, Schmitt UM, et al. Serum CEA and CA 15-3 as prognostic factors in primary breast cancer. Br J Cancer. 2002 Apr; 86(8): 1217-22. doi: 10.1038/sj.bjc.6600248
7. Bartlett JM, Going JJ, Mallon EA, Watters AD, Reeves JR, Stanton P, et al. Evaluating HER2 amplification and overexpression in breast cancer. J Pathol. 2001 Nov; 195(4): 422-28. doi: 10.1002/path.971
8. 8. Ludovini V, Gori S, Colozza M, Pistola L, Rulli E, Floriani I, et al. Evaluation of serum HER2 extracellular domain in early breast cancer patients: correlation with clinicopathological parameters and survival. Ann Oncol. 2008 May; 19(5): 883-90. doi: 10.1093/annonc/mdm585
9. Yakes FM, Chinratanalab W, Ritter CA, King W, Seelig S, Arteaga CL. Herceptin-induced inhibition of phosphatidylinositol-3 kinase and Akt Is required for antibody-mediated effects on p27, cyclin D1, and antitumor action. Cancer Res. 2002 Jul; 62(14): 4132-41.
10. Cooley S, Burns LJ, Repka T, Miller JS. Natural killer cell cytotoxicity of breast cancer targets is enhanced by two distinct mechanisms of antibody-dependent cellular cytotoxicity against LFA-3 and HER2/neu. Exp Hematol. 1999 Oct; 27(10): 1533-41.
11. Valabrega G, Montemurro F, Aglietta M. Trastuzumab: mechanism of action, resistance and future perspectives in HER2-overexpressing breast cancer. Ann Oncol. 2007 Jun; 18(6): 977-84. doi: 10.1093/annonc/mdl475
12. Baselga J, Norton L, Albanell J, Kim YM, Mendelsohn J. Recombinant humanized anti-HER2 antibody (Herceptin) enhances the antitumor activity of paclitaxel and doxorubicin against HER2/neu overexpressing human breast cancer xenografts. Cancer Res. 1998 Jul; 58(13): 2825-31.
13. Goldenberg MM. Trastuzumab, a recombinant DNA-derived humanized monoclonal antibody, a novel agent for the treatment of metastatic breast cancer. Clin Ther. 1999 Feb; 21(2): 309-18. doi: 10.1016/S0149-2918(00)88288-0
14. Tolosa L, Donato MT, Gómez-Lechón MJ. General Cytotoxicity Assessment by Means of the MTT Assay. Methods Mol Biol. 2015; 1250: 333-48. doi: 10.1007/978-1-4939-2074-7_26.
15. Davoli A, Hocevar BA, Brown TL. Progression and treatment of HER2-positive breast cancer. Cancer Chemother Pharmacol. 2010 Mar; 65(4): 611-23. doi: 10.1007/s00280-009-1208-1
16. Bange J, Zwick E, Ullrich A. Molecular targets for breast cancer therapy and prevention. Nat Med. 2001 May; 7(5): 548-52. doi: 10.1038/87872
17. Duffy MJ. Serum tumor markers in breast cancer: are they of clinical value? Clin Chem. 2006 Mar; 52(3): 345-51. doi: 10.1373/clinchem.2005.059832
18. Rilke F, Colnaghi MI, Cascinelli N, Andreola S, Baldini MT, Bufalino R, et al. Prognostic significance of HER-2/neu expression in breast cancer and its relationship to other prognostic factors. Int J Cancer. 1991 Aug; 49(1): 44-49.
19. Ross JS, McKenna BJ. The HER-2/neu oncogene in tumors of the gastrointestinal tract. Cancer Invest. 2001; 19(5): 554-68.
20. Widakowich C, Dinh P, de Azambuja E, Awada A, Piccart-Gebhart M. HER-2 positive breast cancer: what else beyond trastuzumab-based therapy? Anticancer Agents Med Chem. 2008; 8(5): 488-96.doi: 10.2174/187152008784533062
21. Romond EH, Perez EA, Bryant J, Suman VJ, Geyer CE Jr, Davidson NE, et al. Trastuzumab plus adjuvant chemotherapy for operable HER2-positive breast cancer. N Engl J Med. 2005 Oct; 353(16): 1673-84. doi: 10.1056/NEJMoa052122
22. Campiglio M, Locatelli A, Olgiati C, Normanno N, Somenzi G, Viganò L, et al. Inhibition of proliferation and induction of apoptosis in breast cancer cells by the epidermal growth factor receptor (EGFR) tyrosine kinase inhibitor ZD1839 ('Iressa') is independent of EGFR expression level. J Cell Physiol. 2004 Feb; 198(2): 259-68. doi: 10.1002/jcp.10411
23. Kazemi M, Amani J, Salmanian A H, Forghanifard MM, Aghamollaei H. [Design and expression of recombinant HER-2 antigen as a marker for detection of breast cancer]. Pathobiol Res. 2015; 17(4): 88-99. [Article in Persian]
24. Albanell J, Codony J, Rovira A, Mellado B, Gascón P. Mechanism of action of anti-HER2 monoclonal antibodies: scientific update on trastuzumab and 2C4. Adv Exp Med Biol. 2003; 532: 253-68.
25. Sun Y, Feng X, Qu J, Han W, Liu Z, Li X, et al. Expression and Characterization of the Extracellular Domain of Human HER2 from Escherichia Coli, and Production of Polyclonal Antibodies Against the Recombinant Proteins. Appl Biochem Biotechnol. 2015 Jun; 176(4): 1029-43. doi: 10.1007/s12010-015-1627-x
ارسال پیام به نویسنده مسئول


XML   English Abstract   Print


Download citation:
BibTeX | RIS | EndNote | Medlars | ProCite | Reference Manager | RefWorks
Send citation to:

Kiarostami N, Amani J, Imani Fooladi A A, Mirhosseini A. Effect of recombinant Herceptin on the growth of breast cancer cells. J Gorgan Univ Med Sci. 2019; 21 (2) :120-127
URL: http://goums.ac.ir/journal/article-1-3320-fa.html

کیارستمی نفیسه، امانی جعفر، ایمانی فولادی عباسعلی، میرحسینی سیدعلی. اثر هرسپتین نوترکیب بر رشد سلول‌های سرطانی پستان. مجله علمي دانشگاه علوم پزشكي گرگان. 1398; 21 (2) :120-127

URL: http://goums.ac.ir/journal/article-1-3320-fa.html



دوره 21، شماره 2 - ( تابستان 1398 ) برگشت به فهرست نسخه ها
مجله علمی دانشگاه علوم پزشکی گرگان Journal of Gorgan University of Medical Sciences
Persian site map - English site map - Created in 0.06 seconds with 31 queries by YEKTAWEB 3937