fa ارزیابی بیان عوامل رشد عصبی و تکثیر سلولی در هم‌کشتی سلول‌های بنیادی مزانشیمی با سلول‌های بنیادی عصبی سلول‌های بنیادی Stem Cells تحقيقي Original Articles زمینه و هدف : هم‌کشتی سلول‌های بنیادی یکی از روش‌های مورد استفاده محققین علم سلول‌درمانی است. با این روش می‌توان باعث بهبود شرایط کشت و تمایز بهتر سلول‌های بنیادی شد. عوامل رشد عصبی، مولکول‌هایی هستند که نقش‌های بسیار حیاتی در بقاء، تکثیر و تمایز سلول‌های بنیادی دارند. این مطالعه به منظور ارزیابی بیان عوامل نوروتروفیک یا رشد عصبی و سرعت تکثیر سلول‌های بنیادی عصبی (Neural Stem Cells: NSCs) در هم‌کشتی این سلول‌ها با سلول‌های بنیادی مزانشیمی (Mesenchymal Stem Cells: MSCs) انجام شد. روش بررسی : این مطالعه تجربی روی 40 سر موش صحرایی بالغ نژاد ویستار در دانشکده زیست‌شناسی دانشگاه دامغان انجام شد. سلول‌های NSC و MSC از موش‌های صحرایی استخراج شدند. برای جداسازی NSCs ، ناحیه شکنج دندانه‌ای هیپوکامپ برداشته شد. پس از هضم مکانیکی و آنزیمی، توده سلولی در محیط DMEM/F12 حاوی FBS کشت داده شد. برای جداکردن MSCs مغز استخوان، استخوان‌های فمور و تیبیا تخلیه و در محیط فوق‌الذکر کشت داده شد. هم‌کشتی NSCs با MSCs در ظرف ترانس‌ول و در محیط DMEM/F12 حاوی FBS انجام شد. تعیین هویت سلولی، سرعت تکثیر و نیز بیان عوامل نوروتروفیک (CNTF&lrm;, BDNF, &lrm;GDN&lrm;F, &lrm;NT-&lrm;3) به ترتیب با روش‌های ایمنوسیتوشیمی، هموسایتومتر و RT-PCR انجام گردید. یافته‌ها : مقایسه نیمه کمی بیان عوامل نوروتروفیک بین گروه‌های &lrm;NSC&lrm; هم‌کشتی و NSCs که به تنهایی (کنترل) کشت شده بود؛ تفاوتی نشان نداد؛ ولی نتایج نشان داد که الگوی بیان &lrm;NTFs (neurotrophins) در NSCs و &lrm;&lrm;MSCs&lrm; مشابه یکدیگر هستند. تکثیر NSCs در شرایط هم‌کشتی به‌طور معنی‌داری افزایش یافت (P<0.05). Background and Objective: Neurotrophic factors are diffusible polypeptides that have critical roles in survival, proliferation and differentiation of stem cells. This study was done to assess the role of neurotrophic factors (CNTF&lrm;, BDNF, &lrm;GDN&lrm;F, &lrm;NT-&lrm;3&lrm;) expression and proliferation rate of neural stem cells (NSCs) in coculture with mesenchymal stem cells (MSCs). Materials and Methods: In this experimental study, NSCs and MSCs were isolated from adult Wistar rat. Initially, NSCs was harvested from temporal lobe after mechanical digestion by a sterile flamed Pasteur pipette and enzymatic digestion with trypsin and Dnase. The cell suspension was cultivated in a flask with DMEM/F12 medium supplemented with 10% FBS 100U/ml Penicillin and 100 mg/ml Streptomycin. To obtain MSCs, bone marrow of femur and tibia bones were flashed out and cultured. MSCs and NSCs&lrm; cocultured by transwell &lrm;system in DMEM/F12 medium supplemented with 10% FBS 100U/ml Penicillin and 100 mg/ml Streptomycin. Haemocytometer, immunocytochemistry and RT-PCR methods were performed to identify and evaluate cell proliferation, purity levels and neurotrophic factors expression. Results: There &lrm;is&lrm; no differences in NTFs profile of &lrm;neurotrophic&lrm; factors expression between &lrm;coculture &lrm;group&lrm; &lrm;and&lrm; control &lrm;NSCs, but interactions between MSCs and NSCs significantly promoted NSCs proliferation (P<0.05). Conclusion: This study showed that coculture of NSCs with MSCs might be prfered in cell-therapy than&lrm; NSCs.&lrm; سلول‌های بنیادی مزانشیمی , سلول‌های بنیادی عصبی , هم‌کشتی , عوامل رشد عصبی Stem cell, Neural cell, Mesenchymal cell, Coculture, CNTF‎, BDNF, ‎GDN‎F, ‎NT-‎3 1 9 http://goums.ac.ir/journal/browse.php?a_code=A-10-1-574&slc_lang=fa&sid=1 Falsafinia Gh (MSc) قدرت اله فلسفی نیا 5900319475328460050815 5900319475328460050815 No MSc in Developmental Cell Biology, Department of Cellular and Molecular Biology, School of Biology, Damghan University, Damghan, Iran کارشناسی ارشد زیست شناسی سلولی تکوینی ، گروه سلولی و مولکولی ، دانشکده زیست شناسی، دانشگاه دامغان Ghorbanian MT (PhD) محمدتقی قربانیان ghorbanian@du.ac.ir 5900319475328460050816 5900319475328460050816 Yes Assistant Professor, Department of Cellular and Molecular Biology, School of Biology and Institute of Biological Sciences, Damghan University, Damghan, Iran استادیار ، گروه سلولی و مولکولی ، دانشکده زیست شناسی و پژوهشکده علوم زیستی ، دانشگاه دامغان Lashkarbolouki T (PhD) تقی لشکر بلوکی 5900319475328460050817 5900319475328460050817 No Assistant Professor, Department of Cellular and Molecular Biology, School of Biology and Institute of Biological Sciences, Damghan University, Damghan, Iran استادیار ، گروه سلولی و مولکولی ، دانشکده زیست شناسی و پژوهشکده علوم زیستی ، دانشگاه دامغان Elahdadi Salmani M (PhD) محمود اله دادی سلمانی 5900319475328460050818 5900319475328460050818 No Assistant Professor, Department of Cellular and Molecular Biology, School of Biology and Institute of Biological Sciences, Damghan University, Damghan, Iran استادیار ، گروه سلولی و مولکولی ، دانشکده زیست شناسی و پژوهشکده علوم زیستی ، دانشگاه دامغان، گروه سلولی و مولکولی ، دانشکده زیست شناسی و پژو�