[صفحه اصلی ]   [Archive] [ English ]  
:: صفحه اصلي :: معرفي مجله :: آخرين شماره :: آرشيو مقالات :: جستجو :: ثبت نام :: ارسال مقاله :: تماس با ما ::
:: دوره 23، شماره 3 - ( پاییز 1400 ) ::
جلد 23 شماره 3 صفحات 90-84 برگشت به فهرست نسخه ها
کلونینگ و بیان ژن اورات اکسیداز استرپتومایسس جدا شده از دریا در باکتری اشریشیاکلی اوریگامی
نیره سادات جنابان1 ، الهه علی عسگری* 2، کیومرث امینی3
1- کارشناس ارشد زیست شناسی، گروه زیست شناسی، واحد تهران شرق، دانشگاه آزاد اسلامی، تهران، ایران.
2- استادیار، گروه زیست شناسی، واحد تهران شرق، دانشگاه آزاد اسلامی، تهران، ایران. ، e.asgari@gmail.com
3- استادیار، گروه میکروبیولوژی، دانشکده علوم، واحد ساوه، دانشگاه آزاد اسلامی، ساوه، ایران.
چکیده:   (85 مشاهده)

زمینه و هدف: استرپتومایسس‌ها باکتری‌های رشته‌ای گرم مثبت و هوازی هستند که از منابع متفاوت جدا می‌شوند. این باکتری‌ها توانایی تولید متابولیت‌های ثانویه و مواد فعال بیولوژیکی را دارند و از این جهت در زمینه بیوکنترل بسیار حائز اهمیت هستند. اورات اکسیداز یکی از فراورده‌های آنزیمی میکروبی است که از منابع مختلفی از جمله استرپتومایسس قابل استخراج است. این مطالعه به منظور کلونینگ و بیان ژن اورات اکسیداز استرپتومایسس جدا شده از دریا در باکتری اشریشیاکلی اوریگامی انجام شد.
روش بررسی: در این مطالعه توصیفی تعداد 60 نمونه آب و رسوب از اعماق متفاوت سواحل دریای خزر در استان مازندران جمع‌آوری گردید. آزمون‌های رنگ آمیزی گرم، متیل رد،VP، سیترات، هیدرولیز نشاسته، هیدرولیز کازئین، احیا نیترات، اکسیداز وکاتالاز برای تعیین هویت و جداسازی استرپتومایسس دریا انجام شد. ژن اورات اکسیداز توسط روش کلونینگ T-A با استفاده از وکتور PTG-19 در درون میزبان اشریشیاکلی اوراگامی کلون گردید. بیان ژن کلون شده در کلنی‌های نوترکیب توسط روش Real time PCR بررسی شد. با استفاده از نرم‌افزارهای clustalX و Mega5درخت فیلوژنی رسم گردید.
یافته‌ها: غربالگری نمونه‌های آب دریا 12 ایزوله استرپتومایسس را شناسایی کرد که همگی دارای ژن اورات اکسیداز بودند. بیان ژن اورات اکسیداز در اشریشیاکلی اوریگامی توسط روش Real-Tima PCR به اثبات رسید. نتـایج بررسی‌های فیلوژنتیکی، برخی خویشاوندان نزدیک استرپتومایسس را به عنوان کاندید مطالعات بعدی معرفی نمود.
نتیجه‌گیری: باکتری استرپتومایسس می‌تواند به عنوان منبع غنی از متابولیت‌های ثانویه با کاربردهای فراوان مورد توجه قرار گیرد و به عنوان سویه‌ای بومی به منظور تولید آنزیم اورات اکسیداز به کار رود. با به کار بردن میزبان‌های کلونینگ مختلف و بررسی شرایط بهینه تولید، این سویه می‌تواند نامزد مطالعات آینده به منظور ساخت داروها و ترکیبات ضدمیکروبی باشد.

واژه‌های کلیدی: کلونینگ، اورات اکسیداز، Real Time PCR، دریای خزر
Article ID: Vol23-44
متن کامل [PDF 602 kb]   (82 دریافت)    
نوع مطالعه: تحقيقي | موضوع مقاله: بیوتکنولوژی پزشکی
* نشانی نویسنده مسئول: تهران، جاده خاوران، خیابان شهید باهنر، دانشگاه آزاد اسلامی، واحد تهران شرق (قیام دشت)، تلفن 91312141-021
فهرست منابع
1. Cheng X, Liu F, Zhang Y, Jiang Y. Cloning and expression of a urate oxidase and creatinine hydrolase fusion gene in Escherichia coli. Ren Fail. 2013; 35(2): 275-8. DOI: 10.3109/0886022X.2012.745787 [DOI] [PubMed]
2. Asghari N, Shahzadeh Fazeli SA, Amoozegar MA. [Screening and biosynthesis of Uricase enzyme-producing salt-loving arc strains]. M.A Thesis. University of Science and Culture. Faculty of Basic Sciences. 2016. [Persian]
3. Tork SE, Aly MM, Elsemin O. A new l-glutaminase from Streptomyces pratensis NRC 10: Gene identification, enzyme purification, and characterization. Int J Biol Macromol. 2018 Jul; 113: 550-57. DOI: 10.1016/j.ijbiomac.2018.02.080 [DOI] [PubMed]
4. Ebrahimi Sh, JameiR, Imani M. [Cloning and expression of Uricase gene of Baciluss subtilis in bacterial strain (BL21) E.coli]. M.A Thesis. Faculty of Sciences. Urmia University. 2014.
5. Satoh E, Niimura Y, Uchimura T, Kozaki M, Komagata K. Molecular cloning and expression of two alpha-amylase genes from Streptococcus bovis 148 in Escherichia coli. Appl Environ Microbiol. 1993 Nov; 59(11): 3669-73. DOI: 10.1128/aem.59.11.3669-3673.1993 [DOI] [PubMed]
6. Kämpfer P. The Family Streptomycetaceae, Part I: Taxonomy. In: Dworkin M, Falkow S, Rosenberg E, Schleifer KH, Stackebrandt E. (eds). The Prokaryotes. New York: Springer. 2006; pp: 538-604. DOI: 10.1007/0-387-30743-5_22 [Article] [DOI]
7. Mabrouk AM, Hamed ER, Farag MM, Ahmed NE. Purification and Characterization of Uricase Enzyme Produced by Gliomastix gueg. Gate 2 Biotech. 2010; 2(11): 1-13. [View at Publisher]
8. Song J, Lee SC, Kang JW, Baek HJ, Suh JW. Phylogenetic analysis of Streptomyces spp. isolated from potato scab lesions in Korea on the basis of 16S rRNA gene and 16S-23S rDNA internally transcribed spacer sequences. Int J Syst Evol Microbiol. 2004 Jan; 54(Pt 1): 203-209. DOI: 10.1099/ijs.0.02624-0 [DOI] [PubMed]
9. Ohe T, Watanabe Y. Purification and properties of urate oxidase from Streptomyces cyanogenus. J Biochem. 1981 Jun; 89(6): 1769-76. DOI: 10.1093/oxfordjournals.jbchem.a133376 [DOI] [PubMed]
10. Ciesarova Z, Kiss E, Boegl P. Impact of L-asparaginase on acrylamide content in potato products. J Food and Nutr Res. 2006;45(4):141-46. [Article]
11. Imani M, Pazhang M, Mirzaeinia S. [Cloning and Expression of Therapeutic Enzyme, Aspergillus Flavus Uricase in E. coli]. J Adv Med Biomed Res. 2016; 24(106): 109-121. [Article in Persian] [View at Publisher]
12. Shaaban MI, Abdelmegeed E, Ali YM. Cloning, Expression, and Purification of Recombinant Uricase Enzyme from Pseudomonas aeruginosa Ps43 Using Escherichia coli. J Microbiol Biotechnol. 2015 Jun; 25(6):887-92. DOI: 10.4014/jmb.1410.10041 [DOI] [PubMed]
ارسال پیام به نویسنده مسئول


XML   English Abstract   Print


Download citation:
BibTeX | RIS | EndNote | Medlars | ProCite | Reference Manager | RefWorks
Send citation to:

Jenaban N S, Ali Asgari E, Amini K. Cloning and Expression of Urate Oxidase Gene Isolated from Marine Streptomyces in Escherichia coli Origami Bacteria. J Gorgan Univ Med Sci. 2021; 23 (3) :84-90
URL: http://goums.ac.ir/journal/article-1-3835-fa.html

جنابان نیره سادات، علی عسگری الهه، امینی کیومرث. کلونینگ و بیان ژن اورات اکسیداز استرپتومایسس جدا شده از دریا در باکتری اشریشیاکلی اوریگامی. مجله علمي دانشگاه علوم پزشكي گرگان. 1400; 23 (3) :90-84

URL: http://goums.ac.ir/journal/article-1-3835-fa.html



بازنشر اطلاعات
Creative Commons License این مقاله تحت شرایط Creative Commons Attribution-NonCommercial 4.0 International License قابل بازنشر است.
دوره 23، شماره 3 - ( پاییز 1400 ) برگشت به فهرست نسخه ها
مجله علمی دانشگاه علوم پزشکی گرگان Journal of Gorgan University of Medical Sciences
Persian site map - English site map - Created in 0.04 seconds with 29 queries by YEKTAWEB 4374